顕微鏡 第49巻▶第3号 2014
■連続スライスSEMによる医学・生物学研究の最前線

FIB/SEMトモグラフィー法による三次元再構築の特徴

太田啓介,金澤知之進,中村桂一郎

久留米大学医学部解剖学講座顕微解剖・生体形成部門

要旨:FIB/SEMトモグラフィー法はSEM連続スライス観察による生体組織の三次元再構築法の一つであり,その特徴は試料切削に収束イオンビーム(FIB)を用いる点にある.FIBで切削した試料表面は比較的帯電し難く,導電性の低い様々な生体組織観察に応用可能である.また,本手法はFIBという歴史のある微細加工技術を用いることで,電子線トモグラフィー法に準ずる高い分解能の三次元構造解析や,骨などの硬組織の観察を可能とする.三次元再構築できる領域は最大約100 μm角の領域に限られるものの,FIB/SEMでは観察できる試料サイズに特別な制限がないため,肉眼レベルの臓器をSEMで俯瞰して観察しつつ,注目領域のみを詳細に立体再構築することができる.この特徴は,臓器や病変の構造を解析する医学領域の課題において特に有用である.またFIB/SEMトモグラフィー法は,CLEM観察(光学顕微鏡で観察した同じ場所を電子顕微鏡で観察する相関観察法)とも相性が良く,汎用性の高い三次元観察手法である.

キーワード:FIB/SEMトモグラフィー,医学生物学応用,ミトコンドリア,ブロックフェイス像

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